Đăng nhập để tải tài liệu không giới hạn
Tham gia 8.000+ người dùng Thư Viện Luận Án
Viện Công nghệ Sinh học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam
Đỗ Hải Lan
Luận án Nghiên cứu thiết kế và chuyển gen AGPopt tổng hợp nhân tạo vào cây sắn (Manihot esculenta Crantz)
Chuyên ngành: Y tế - Sức khoẻ
Luận án
2017
1Đăng nhập để xem toàn bộ nội dung
Đăng nhập ngayMục lục
1. Lời nói đầu .......................... 3
2. Chương 1: Giới thiệu ............ 7
3. Chương 2: Nội dung nghiên cứu .. 28
4. Kết luận ................................ 70
Nghiên cứu thiết kế và chuyển gen AGPopt tổng hợp nhân tạo vào cây sắn (Manihot esculenta Crantz)
Sinh lý học thực vật Mã số: 62 42 01 12
Luận án này tập trung vào nghiên cứu thiết kế và chuyển gen AGPopt tổng hợp nhân tạo vào cây sắn (Manihot esculenta Crantz), mang lại những đóng góp quan trọng trong lĩnh vực sinh lý học thực vật và công nghệ sinh học cây trồng. Các kết luận mới của luận án bao gồm việc xây dựng thành công quy trình tái sinh cây sắn thông qua phôi soma. Cụ thể, quy trình này được phát triển từ đỉnh chồi và thùy lá non của hai giống sắn phổ biến tại Việt Nam là KM140 và KM94, với sự hình thành trên môi trường MS có bổ sung picloram 12 mg/l và tái sinh chồi trên môi trường chứa BAP 0,3 mg/l.
Bên cạnh đó, nghiên cứu đã thử nghiệm thành công quy trình chuyển gen vào cây sắn sử dụng vi khuẩn A. tumefaciens với gen gus vào phôi soma, đạt hiệu quả chuyển gen là 0,9%. Đây là một bước quan trọng trong việc phát triển các phương pháp biến đổi gen hiệu quả cho cây sắn.
Một đóng góp cốt lõi khác là việc tổng hợp nhân tạo gen AGPopt. Gen này được thiết kế dựa trên cấu trúc của protein GlgC (mã số AKD93525.1) từ E.coli K12, trong đó mã di truyền đã được tối ưu hóa để phù hợp với sự biểu hiện trong thực vật. Đồng thời, một đột biến thay thế G336D cũng đã được bổ sung vào cấu trúc gen này. Cấu trúc gen AGPopt sau đó được thiết kế vào vector chuyển gen pBI121 và đã được kiểm tra khả năng biểu hiện. Kết quả cho thấy gen này làm tăng hoạt tính của enzim AGPase và hàm lượng tinh bột ở lá của cây thuốc lá, chứng minh tiềm năng ứng dụng của nó trong việc cải thiện đặc tính cây trồng.
Cuối cùng, luận án đã chuyển thành công cấu trúc gen AGPopt vào cây sắn giống KM94 thông qua phôi soma. Bước đầu, kỹ thuật PCR đã được sử dụng để kiểm tra và xác nhận sự hiện diện của gen nptII và AGPopt ở 5 trên 6 dòng cây sắn chuyển gen, khẳng định khả năng tích hợp gen mong muốn vào hệ gen cây sắn và mở ra hướng phát triển các giống sắn có năng suất và chất lượng tinh bột cao hơn.
Tải không giới hạn tất cả tài liệu, không cần chờ. Chỉ từ 199.000đ/tháng.
Xem gói hội viên