Đăng nhập để tải tài liệu không giới hạn
Tham gia 8.000+ người dùng Thư Viện Luận Án
NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO VẮC XIN TÁI TỔ HỢP PHÒNG BỆNH DO XOẮN KHUẨN Leptospira interrogans GÂY RA
Công nghệ Sinh học
Bệnh Leptospirosis do xoắn khuẩn Leptospira interrogans là một bệnh truyền nhiễm cấp tính phổ biến ở cả người và động vật tại Việt Nam, gây ra nhu cầu cấp thiết về vắc xin an toàn, hiệu quả. Luận án này tập trung vào nghiên cứu chế tạo vắc xin tái tổ hợp phòng bệnh do Leptospira interrogans gây ra.
Mục tiêu của nghiên cứu là xác định các gen quyết định kháng nguyên tiềm năng và chế tạo vắc xin tái tổ hợp. Các nội dung chính bao gồm nuôi cấy, định danh phân tử và xây dựng cây phát sinh chủng loại của 5 chủng Leptospira interrogans tại Việt Nam (L. Bataviae, L. Canicola, L. Grippotyphosa, L. Icterohaemorrhagiae, L. Pomona), tất cả đều thuộc nhóm Leptospira interrogans.
Nghiên cứu đã xác định và phân tích các gen kháng nguyên như OmpL1, LipL32, LipL21, LipL41, LigA, trong đó gen LipL21 được chọn để nghiên cứu sâu. Trình tự nucleotit và axit amin của gen LipL21 trên cả 5 chủng đã được xác định là đồng nhất, cho phép xây dựng một cấu trúc 3D duy nhất. Hai vùng giàu epitope (axit amin 2-70 và 71-119) có khả năng tạo miễn dịch cao đã được tìm thấy.
Luận án đã nhân dòng và biểu hiện thành công protein tái tổ hợp LipL21 (rLipL21) trong hệ thống E.coli, với các điều kiện biểu hiện được tối ưu hóa (nhiệt độ 37°C, nồng độ IPTG 0,2 mM, thời gian cảm ứng 4h). Protein rLipL21 tinh sạch được tiêm thử nghiệm trên thỏ và cho thấy khả năng sinh miễn dịch mạnh mẽ với nồng độ 500µg.
Vắc xin tái tổ hợp rLipL21 dạng nhũ dầu (tỷ lệ 1 phần nhũ dầu: 2 phần kháng nguyên) với liều tiêm 1ml đã được chế tạo và kiểm nghiệm. Các mẫu vắc xin đạt các chỉ tiêu về vô trùng, an toàn và hiệu lực theo tiêu chuẩn Việt Nam và GMP-WHO. Thử nghiệm trên động vật (chuột lang, chuột nhắt trắng) cho thấy vắc xin an toàn và có hiệu lực bảo hộ 100% đối với 5 chủng Leptospira. Thử nghiệm thực địa 600 liều trên bò và chó tại Hà Nam, Phú Thọ cũng thành công, chứng minh tính an toàn và hiệu quả của vắc xin.
Nghiên cứu này đóng góp dữ liệu khoa học mới và là bước tiến quan trọng trong việc phát triển vắc xin tái tổ hợp phòng bệnh Leptospirosis cho động vật tại Việt Nam, hứa hẹn một loại vắc xin an toàn, hiệu quả cao, bền vững và giá thành hợp lý.
Tải không giới hạn tất cả tài liệu, không cần chờ. Chỉ từ 199.000đ/tháng.
Xem gói hội viên