Đăng nhập để tải tài liệu không giới hạn
Tham gia 8.000+ người dùng Thư Viện Luận Án
Viện Công nghệ sinh học
La Việt Hồng
Luận án Nghiên cứu biểu hiện protein tái tổ hợp miraculin trong dòng tế bào BY2, rễ tơ thuốc lá và cây cà chua chuyển gen
Chuyên ngành: Khoa học tự nhiên
Luận án
2014
1Đăng nhập để xem toàn bộ nội dung
Đăng nhập ngayMục lục
1. Lời nói đầu .......................... 3
2. Chương 1: Giới thiệu ............ 7
3. Chương 2: Nội dung nghiên cứu .. 28
4. Kết luận ................................ 70
Nghiên cứu biểu hiện protein tái tổ hợp miraculin trong dòng tế bào BY2, rễ tơ thuốc lá và cây cà chua chuyển gen
Sinh lý học thực vật
Luận án tập trung vào nghiên cứu biểu hiện protein tái tổ hợp miraculin trong các hệ thống thực vật khác nhau. Công trình đã khởi đầu bằng việc thay đổi mã di truyền của gen miraculin từ cây thần kỳ để tối ưu hóa sự biểu hiện trong hệ thống cây họ cà. Đồng thời, ba trình tự quan trọng đã được phân lập và tách dòng thành công, bao gồm promoter E8 từ cây cà chua, cùng với promoter và terminator HSP 18.2 từ cây Arabidopsis thaliana.
Trên cơ sở này, nghiên cứu đã thiết kế thành công ba cấu trúc vector chuyển gen: pBI121/35S-pro/Mir/NOS-ter, pBI121/E8-pro/Mir/HSP-ter và pBI121/HSP-pro/Mir/HSP-ter. Các vector này được sử dụng để chuyển gen miraculin vào dòng tế bào BY2, rễ tơ thuốc lá và cây cà chua.
Kết quả cho thấy, protein miraculin tái tổ hợp đã được biểu hiện thành công trong dòng tế bào BY2 với hàm lượng dao động từ 1,13 đến 3,10 ng/µg protein tan tổng số. Hệ thống rễ tơ thuốc lá cũng cho thấy sự biểu hiện hiệu quả với hàm lượng từ 13,7 đến 19,97 ng/µg protein tan tổng số.
Một thành tựu đáng kể là việc tạo ra 27 dòng cà chua mang chuyển gen miraculin, trong đó có 5 dòng mang bản đơn copy (T.E8.4, T.E8.7, T.E8.8, T.35S.2, T.35S8). Luận án cũng chỉ ra rằng miraculin tái tổ hợp biểu hiện ở vỏ quả của các dòng cà chua được chuyển cấu trúc E8-pro/Mir/HSP-ter cao hơn đáng kể so với các dòng mang cấu trúc 35S-pro/Mir/NOS-ter. Đặc biệt, dòng T.E8.8 đạt hàm lượng cao nhất là 118,0 ng/µg protein tan tổng số, gấp 4 lần so với các dòng T.35S.2 và T.35S8. Quan trọng hơn, miraculin tái tổ hợp được biểu hiện trong quả cà chua đã chứng minh hoạt tính tương tự miraculin trong quả thần kỳ tự nhiên.
Tải không giới hạn tất cả tài liệu, không cần chờ. Chỉ từ 199.000đ/tháng.
Xem gói hội viên