Luận án Thiết lập chất đối chiếu hypophyllanthin, niranthin và xác định một số thông số dược động học của cao chuẩn hóa điều chế từ Diệp hạ châu đắng

Tên luận án:

THIẾT LẬP CHẤT ĐỐI CHIẾU HYPOPHYLLANTHIN, NIRANTHIN VÀ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THÔNG SỐ DƯỢC ĐỘNG HỌC CỦA CAO CHUẨN HÓA ĐIỀU CHẾ TỪ DIỆP HẠ CHÂU ĐẲNG (PHYLLANTHUS AMARUS SCHUM. ET THONN., EUPHORBIACEAE)

Ngành:

Kiểm nghiệm thuốc và độc chất

Tóm tắt nội dung tài liệu:

Luận án tập trung vào việc nâng cao tiêu chuẩn hóa và đánh giá dược động học của Diệp hạ châu đắng (DHCĐ), một dược liệu phổ biến trong điều trị các bệnh lý về gan, đặc biệt là viêm gan B. Hiện trạng cho thấy nhiều sản phẩm từ DHCĐ thiếu tiêu chuẩn định lượng cụ thể cho các hoạt chất sinh học chính như phyllanthin, hypophyllanthin, và niranthin, cũng như thiếu chất chuẩn đối chiếu và nghiên cứu dược động học. Các chất này đóng vai trò quan trọng trong tác dụng bảo vệ gan, kháng viêm và chống ung thư của DHCĐ.

Mục tiêu của luận án là chiết xuất, phân lập, tinh chế và xác định cấu trúc của các hợp chất lignan từ DHCĐ; thiết lập các chất đối chiếu hypophyllanthin và niranthin; điều chế và tiêu chuẩn hóa cao Diệp hạ châu đắng; và đánh giá các thông số dược động học của cao chuẩn hóa này.

Các kết quả nổi bật bao gồm việc phân lập thành công 5 hợp chất lignan chính (phyllanthin, hypophyllanthin, niranthin, nirtetralin, phyltetralin) với độ tinh khiết cao (>95%) từ DHCĐ, kèm theo bộ dữ liệu phổ nghiệm đầy đủ. Luận án đã thiết lập thành công chất đối chiếu hypophyllanthin và niranthin theo hướng dẫn của WHO và ASEAN. Một quy trình định lượng đồng thời 4 hợp chất lignan (phyllanthin, hypophyllanthin, niranthin, nirtetralin) bằng HPLC đã được xây dựng và thẩm định, cùng với việc xác định điều kiện chiết xuất cao DHCĐ tối ưu (ethanol 30% ở quy mô pilot) cho hàm lượng hoạt chất cao, mang lại hiệu quả kinh tế và an toàn môi trường. Tiêu chuẩn chất lượng cho cao khô DHCĐ cũng đã được xây dựng theo Dược điển Việt Nam và Mỹ. Cuối cùng, luận án đã xây dựng và thẩm định quy trình định lượng đồng thời 3 lignan (phyllanthin, hypophyllanthin, niranthin) trong huyết tương thỏ bằng LC-MS/MS, đồng thời tiến hành khảo sát ban đầu về dược động học, cho thấy các lignan này hấp thu nhanh chóng nhưng thải trừ cũng nhanh và hấp thu kém. Những phát hiện này cung cấp cơ sở khoa học quan trọng cho việc kiểm nghiệm chất lượng, ước tính liều dùng và phát triển các chế phẩm từ DHCĐ.

Mục lục chi tiết:

• Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

  • 1.1. Tổng quan Diệp hạ châu đắng
  • 1.2. Các phương pháp nghiên cứu về chiết xuất, phân lập, tinh chế hợp chất lignan từ Diệp hạ châu đắng
  • 1.3. Các phương pháp định lượng các hợp chất lignan trong Diệp hạ châu
  • 1.4. Cao đối chiếu
  • 1.5. Tổng quan về đánh giá sinh khả dụng của thuốc

• Chương 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

  • 2.1. Đối tượng nghiên cứu:
  • 2.1.2. Chất đối chiếu:
  • 2.1.3. Hóa chất và dung môi:
  • 2.1.4. Động vật thử nghiệm:
  • 2.1.5. Trang thiết bị, vật tư sử dụng nghiên cứu:
  • 2.1.6. Nơi thực hiện nghiên cứu:
  • 2.2. Phương pháp nghiên cứu
  • 2.2.1. Chiết xuất, phân lập, tinh chế, xác định cấu trúc, độ tinh khiết của các chất phân lập được
  • 2.2.1.1. Kiểm tra chất lượng dược liệu nghiên cứu:
  • 2.2.1.2. Chiết xuất cao toàn phần:
  • 2.2.1.3. Phân lập cao toàn phần bằng sắc ký cột:
  • 2.2.1.4. Phân lập hợp chất từ cao phân đoạn:
  • 2.2.1.5. Kiểm tra độ tinh khiết của chất phân lập được:
  • 2.2.1.6. Xác định cấu trúc của chất phân lập được:
  • 2.2.2. Xác định chất lượng và thiết lập chất đối chiếu
  • 2.2.2.1. Xây dựng qui trình xác định độ tinh khiết của nguyên liệu thiết lập chất đối chiếu:
  • 2.2.2.2. Thiết lập chất đối chiếu:
  • 2.2.2.3. Xác định độ tinh khiết chất nirtetralin sau tinh chế
  • 2.2.3. Điều chế và tiêu chuẩn hóa cao diệp hạ châu đắng
  • 2.2.3.1. Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng đồng thời 4 hợp chất lignan trong DHCĐ bằng phương pháp HPLC
  • 2.2.3.2. Điều chế cao chuẩn hóa Diệp hạ châu đắng
  • 2.2.3.3. Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cao khô Diệp hạ châu đắng:
  • 2.2.3.4. Ứng dụng điều chế cao giàu lignan Diệp hạ châu đắng dùng làm cao đối chiếu:
  • 2.2.3.5. Ứng dụng định lượng các lignan trong Diệp hạ châu đắng:
  • 2.2.4. Đánh giá một số thông số dược động học của cao chuẩn hóa điều chế từ diệp hạ châu đắng
  • 2.2.4.1. Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng đồng thời phyllanthin, hypophyllanthin và niranthin trong huyết tương thỏ:
  • 2.2.4.2. Đánh giá một số thông số dược động học của cao chuẩn hóa điều chế từ Diệp hạ châu đắng:

• Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

  • 3.1. Chiết xuất, phân lập, tinh chế, xác định cấu trúc, độ tinh khiết của các chất phân lập được
  • 3.1.1. Kiểm tra chất lượng dược liệu nghiên cứu:
  • 3.1.2. Chiết xuất cao toàn phần từ dược liệu Diệp hạ châu đắng:
  • 3.1.3. Phân lập cao toàn phần bằng sắc ký cột:
  • 3.1.4. Phân lập hợp chất từ cao phân đoạn:
  • 3.1.5. Kiểm tra độ tinh khiết của chất phân lập được:
  • 3.1.6. Xác định cấu trúc của chất phân lập được:
  • 3.2. Xác định chất lượng và thiết lập chất đối chiếu
  • 3.3. Điều chế và tiêu chuẩn hóa cao diệp hạ châu đắng
  • 3.3.1. Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng đồng thời 4 hợp chất lignan trong DHCĐ bằng phương pháp HPLC
  • 3.3.2. Điều chế cao chuẩn hóa Diệp hạ châu đắng
  • 3.3.3. Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cao khô Diệp hạ châu đắng
  • 3.3.4. Ứng dụng điều chế cao giàu lignan dùng làm cao đối chiếu Diệp hạ châu đắng
  • 3.3.5. Ứng dụng định lượng các lignan trong Diệp hạ châu đắng
  • 3.3.5.1. Định lượng các lignan trong một số mẫu dược liệu
  • 3.3.5.2. Định lượng trong các mẫu cao khô Diệp hạ châu đắng
  • 3.4. Đánh giá một số thông số dược động học của cao chuẩn hóa điều chế từ diệp hạ châu đắng
  • 3.4.1. Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng đồng thời phyllanthin, hypophyllanthin và niranthin trong huyết tương thỏ
  • 3.4.2. Đánh giá một số thông số dược động học của cao chuẩn hóa điều chế từ Diệp hạ châu đấng

• Chương 4. BÀN LUẬN

  • 4.1. Chiết xuất, phân lập, tinh chế và xác định cấu trúc, độ tinh khiết của các chất phân lập được
  • 4.2. Xác định chất lượng và thiết lập chất đối chiếu
  • 4.3. Điều chế và tiêu chuẩn hóa cao diệp hạ châu đắng
  • 4.3.1. Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng đồng thời 4 hợp chất lignan trong DHCĐ bằng phương pháp HPLC
  • 4.3.2. Điều chế cao khô Diệp hạ châu đắng
  • 4.3.3. Tiêu chuẩn hóa cao khô Diệp hạ châu đắng
  • 4.3.4. Điều chế cao giàu lignan dùng làm cao đối chiếu Diệp hạ châu đắng
  • 4.4. Đánh giá một số thông số dược động học của cao chuẩn hóa điều chế từ diệp hạ châu đắng
  • 4.4.1. Xây dựng và thẩm định qui trình định lượng đồng thời phyllanthin, hypophyllanthin và niranthin trong huyết tương thỏ
  • 4.4.2. Đánh giá một số thông số dược động học của cao chuẩn hóa điều chế từ diệp hạ châu đắng