Đăng nhập để tải tài liệu không giới hạn
Tham gia 8.000+ người dùng Thư Viện Luận Án
PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN VI KHUẨN Bacillus spp. TỪ CÁC SẢN PHẨM ĐẬU NÀNH LÊN MEN CÓ KHẢ NĂNG SINH PROTEASE VÀ THỦY PHÂN FIBRIN
Công nghệ Sinh học (Mã ngành: 62420201)
Luận án tiến sĩ này nghiên cứu về việc phân lập và tuyển chọn vi khuẩn *Bacillus* spp. từ các sản phẩm đậu nành lên men tại Đồng bằng sông Cửu Long, nhằm mục đích tìm kiếm các chủng có khả năng sinh tổng hợp protease và enzyme thủy phân fibrin cao. Đề tài xuất phát từ nhu cầu lớn về enzyme trong nước cho các ngành công nghiệp, nông nghiệp và y dược, đặc biệt là enzyme fibrinolytic có khả năng phòng ngừa và điều trị các bệnh tim mạch do huyết khối. Tuy nhiên, công nghệ sản xuất enzyme trong nước còn hạn chế, đòi hỏi việc tìm kiếm và phát triển nguồn giống bản địa.
Kết quả nghiên cứu đã phân lập và tuyển chọn được 115 dòng vi khuẩn *Bacillus* spp. từ 45 mẫu sản phẩm đậu nành lên men ở các tỉnh thành thuộc Đồng bằng sông Cửu Long. Dựa trên các đặc điểm hình thái, sinh lý và sinh hóa, tất cả các dòng đều được xác định thuộc giống *Bacillus*. Trong số các dòng được tuyển chọn, dòng ML01 thể hiện hoạt tính enzyme fibrinolytic đặc hiệu cao nhất (124,16 FU/mg). Định danh bằng phương pháp giải trình tự gen 16S rRNA cho thấy dòng ML01 có độ tương đồng 99,86% với *Bacillus subtilis subsp. spizizenii*.
Nghiên cứu cũng tối ưu hóa điều kiện môi trường lên men cho dòng ML01, xác định thành phần tối ưu bao gồm maltose (18,15 g/L), soya peptone (9,59 g/L), K2HPO4 (2,33 g/L) và mật độ vi khuẩn 2,6 x 10^6 tế bào/mL. Điều kiện tối ưu này giúp tăng hoạt tính fibrinolytic enzyme lên 25,56 FU/mL, cao hơn 2,9 lần so với trước khi tối ưu (8,89 FU/mL). Thời gian lên men tối ưu để sinh tổng hợp enzyme là 48 giờ.
Enzyme fibrinolytic từ dòng ML01 đã được tinh sạch đạt độ tinh sạch gấp 4,1 lần so với enzyme thô ban đầu thông qua kết hợp tủa ammonium sulfate, sắc ký trao đổi ion và sắc ký lọc gel, với khối lượng phân tử trong khoảng 26 đến 62 kDa. Các đặc điểm của enzyme được xác định: pH tối ưu là 8 (bền trong khoảng 7-9), nhiệt độ tối ưu 37°C (bền trong khoảng 30-37°C). Ion Cu2+ và Fe2+ làm tăng hoạt tính, trong khi Zn2+, K+, EDTA, SDS và PMSF làm giảm hoặc ức chế hoạt tính. Kết quả này cung cấp cơ sở khoa học, khẳng định dòng ML01 là một vi sinh vật bản địa tiềm năng cho ứng dụng sản xuất enzyme protease và fibrinolytic trong công nghiệp và y dược tại Việt Nam.
Tải không giới hạn tất cả tài liệu, không cần chờ. Chỉ từ 199.000đ/tháng.
Xem gói hội viên