info@luanan.net.vn
VIP Luận án DOC

Luận án Phân lập, tuyển chọn vi khuẩn sợi (Actinobacteria) từ hải miên vùng biển Hà Tiên và xác định hợp chất sinh học kháng vi sinh vật gây bệnh

Năm2022
Lĩnh vựcCông nghệ kỹ thuật
Ngôn ngữTiếng Việt, Tiếng Anh

Mô tả tài liệu

Tên luận án:

PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VI KHUẨN SỢI (ACTINOBACTERIA) TỪ HẢI MIÊN VÙNG BIỂN HÀ TIÊN VÀ XÁC ĐỊNH HỢP CHẤT SINH HỌC KHÁNG VI SINH VẬT GÂY BỆNH

Ngành:

Công nghệ sinh học (Mã ngành: 62420201)

Tóm tắt nội dung tài liệu:

Luận án này tập trung vào việc phân lập, tuyển chọn vi khuẩn sợi (Actinobacteria) từ hải miên vùng biển Hà Tiên và xác định hợp chất sinh học kháng vi sinh vật gây bệnh, nhằm ứng phó với tình trạng kháng kháng sinh ngày càng phổ biến. Nghiên cứu được thực hiện với 5 nội dung chính: phân lập vi khuẩn sợi từ hải miên; đánh giá và tuyển chọn các dòng có khả năng kháng các vi sinh vật gây bệnh thử nghiệm gồm Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium, Escherichia coli và Candida albicans; nhận diện mối liên hệ di truyền bằng kỹ thuật sinh học phân tử; khảo sát sự hiện diện của các gen chỉ thị PKS-I, PKS-II và NRPS; và xác định hợp chất có hoạt tính sinh học từ dòng vi khuẩn sợi tiềm năng nhất.

Kết quả, đã phân lập được 198 dòng vi khuẩn sợi từ hải miên ở vùng biển Hà Tiên, trong đó 130 dòng (đạt 65,7%) có khả năng kháng ít nhất một trong năm loài vi sinh vật thử nghiệm. Mức độ kháng khác nhau giữa các loài, với Bacillus cereus (41,4%) và Salmonella typhimurium (36,9%) có tỷ lệ kháng cao hơn. 23 dòng vi khuẩn sợi có khả năng kháng ít nhất hai dòng vi sinh vật chỉ thị với mức độ từ trung bình đến mạnh đã được tuyển chọn và định danh, thuộc 4 họ: Actinomycetaceae (chiếm 65,2%), Microbacteriaceae (8,7%), Nocardiaceae (21,7%) và Gordoniaceae (4,4%). Các gen chỉ thị sản xuất các chất có hoạt tính sinh học được ghi nhận với tỷ lệ PKS-I là 69,6%, PKS-II là 60,9% và NRPS là 47,8%.

Hai dòng tiềm năng nhất là Streptomyces tateyamensis ND1.7a và Microbacterium tumbae ND2.7c, đã được xác định sản xuất tổng cộng 18 hợp chất có hoạt tính sinh học (7 từ S. tateyamensis ND1.7a và 11 từ M. tumbae ND2.7c), đặc biệt có khả năng kháng nấm và kháng khuẩn. Các hợp chất này bao gồm thymine, 2-Pentanone-4-hydroxy-4-methyl, cyclohexasiloxane dodecamethyl, oxime-methoxy-phenyl, hexanedioic acid bis (2-ethylhexyl) ester, diisooctyl phthalate, cyclopentasiloxane decamethyl-, tetrasiloxane, 1-dodecene, 3-isopropoxy-1.1.1.7.7.7-hexamethyl-3.5.5-tris(trimethylsiloxy) tetrasiloxane, 3,5-di-t-butylphenol, phthalic acid, 3.4-dihydroxymandelic acid 4TMS, 1.6-dioxacyclododecane-7-12-dione, 2-Propyl-1-pentanol, 2-(2'.4'.4'.6'.6'.8'.8'-heptamethyltetrasiloxan-2'yloxy)-2.4.4.6.6.8.8.10.10-nonamethylcyclopentasiloxane và phthalic acid monoethyl ester. Luận án cung cấp cơ sở khoa học quan trọng cho việc nghiên cứu và phát triển dược phẩm mới từ vi sinh vật cộng sinh với hải miên, góp phần bảo vệ sức khỏe con người. Đề xuất nghiên cứu thêm đặc điểm và hoạt tính sinh học của các hợp chất này, cũng như tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy để sản xuất.

Mục lục chi tiết:

  • CHƯƠNG 1. GIỚI THIỆU

    • 1.1 Tính cấp thiết của nghiên cứu
    • 1.2 Mục tiêu nghiên cứu
    • 1.3 Nội dung nghiên cứu
    • 1.4. Đóng góp mới của luận án
    • 1.5. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của luận án
  • CHƯƠNG 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

  • CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

    • 3.1 Nguyên vật liệu
    • 3.2. Phân lập vi khuẩn sợi
    • 3.3. Đánh giá khả năng kháng khuẩn
    • 3.4. Nhận diện vi khuẩn sợi bằng phương pháp sinh học phân tử
    • 3.5. Khuếch đại gen mã hóa PKS-I, PKS-II, và NRPS
    • 3.6. Xác định các hợp chất có hoạt tính sinh học được sản xuất từ vi khuẩn sợi tiềm năng được tuyển chọn
    • 3.7 Xác định cấu trúc hóa học bằng phương pháp cộng hưởng từ hạt nhân (NMR)
    • 3.8 Xác định các hợp chất có hoạt tính sinh học bằng phương pháp sắc ký ghép khối phổ (GC-MS)
  • CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

    • 4.1 Các dòng vi khuẩn sợi phân lập được từ hải miên
      • 4.1.1 Số lượng, nguồn gốc các dòng vi khuẩn sợi phân lập được
      • 4.1.2 Đặc điểm các dòng vi khuẩn sợi phân lập được
        • 4.1.2.1 Đặc điểm khuẩn lạc của các dòng vi khuẩn sợi phân lập được
        • 4.1.2.2 Đặc điểm tế bào của các dòng vi khuẩn sợi phân lập được
    • 4.2 Khả năng kháng khuẩn của các dòng vi khuẩn sợi
    • 4.3 Tuyển chọn và định danh các dòng vi khuẩn sợi
    • 4.4 Nhận diện các gen PKS-I, PKS-II và NRPS ở các dòng vi khuẩn sợi
    • 4.5 Chất kháng khuẩn được sinh ra từ vi khuẩn sợi.
      • 4.5.1 Chất kháng khuẩn từ Streptomyces tateyamensis ND1.7a.
        • 4.5.1.1 Kết quả phân tích cộng hưởng từ hạt nhân (NMR)
        • 4.5.1.2 Kết quả phân tích sắc ký ghép khối phổ (GC-MS)
      • 4.5.2 Chất kháng khuẩn từ Microbacterium tumbae ND2.7c.
  • CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT

    • 5.1 Kết luận
    • 5.2 Đề xuất

Tài liệu liên quan