Đăng nhập để tải tài liệu không giới hạn
Tham gia 8.000+ người dùng Thư Viện Luận Án
NGHIÊN CỨU TẠO GELATINASE TÁI TỔ HỢP VÀ ỨNG DỤNG TRONG THỦY PHÂN GELATIN DA CÁ TRA
Công nghệ sinh học (Mã số: 9 42 02 01)
Luận án tập trung vào nghiên cứu tạo gelatinase tái tổ hợp và ứng dụng enzyme này trong thủy phân gelatin từ da cá Tra, nhằm giải quyết các hạn chế của nguồn gelatinase tự nhiên và phương pháp thủy phân hóa học. Gelatinase là enzyme quan trọng có khả năng thủy phân gelatin, collagen và các protein khác thành peptit ngắn và axit amin. Tuy nhiên, gelatinase tự nhiên thường có nguồn gốc từ vi sinh vật gây bệnh và hoạt tính không cao, trong khi phương pháp thủy phân hóa học gây ô nhiễm môi trường và làm biến tính axit amin.
Mục tiêu của luận án là tạo ra chủng Escherichia coli tái tổ hợp có khả năng tổng hợp gelatinase từ Enterococcus faecalis và ứng dụng enzyme tái tổ hợp (rGEL) này để thủy phân gelatin da cá Tra thành chế phẩm axit amin, sau đó bổ sung vào thức ăn ương cho cá Mú chấm đen nhằm nâng cao hiệu quả. Nghiên cứu được thực hiện tại Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, với đối tượng bao gồm chủng vi khuẩn MD4 sinh gelatinase, các chủng E. coli BL21(DE3), XL1-blue, da cá Tra và cá Mú chấm đen.
Những đóng góp mới của luận án bao gồm việc lần đầu tiên phân lập nguồn gen gelE mã hóa GEL từ vi khuẩn Enterococcus faecalis phân lập tại Việt Nam, đồng thời tạo thành công chủng E. coli BL21[pET22(b)-gelE] biểu hiện rGEL với hoạt độ đạt 2,45 U/ml, cao gấp 6 lần so với chủng gốc. rGEL tái tổ hợp có trọng lượng phân tử khoảng 46 kDa và được biểu hiện tối ưu ở pH 6,5-7, nhiệt độ 34°C với 0,05 mM IPTG. Enzyme này có hoạt tính xúc tác phù hợp ở 37-50°C (tối ưu 40°C), bền nhiệt và hoạt động tốt trong dải pH kiềm 7,5-11 (tối ưu 7,0-7,5), được hoạt hóa bởi ion Ca2+ và bị kìm hãm bởi các ion kim loại như Co2+, Fe2+, Mn2+, EDTA. Luận án cũng xác định được các điều kiện tối ưu cho thủy phân gelatin da cá Tra bằng rGEL, tạo ra sản phẩm chứa 49,37 g/100 g tổng axit amin, trong đó 27,73% là axit amin thiết yếu. Ứng dụng ban đầu chế phẩm axit amin này trong thức ăn ương cá Mú chấm đen cho thấy hiệu quả cao, đạt tỷ lệ sống từ 96,25% đến 98,75% và cải thiện các chỉ số tăng trưởng.
Thông tin mục lục chi tiết không được cung cấp trong văn bản gốc.
Tải không giới hạn tất cả tài liệu, không cần chờ. Chỉ từ 199.000đ/tháng.
Xem gói hội viên