Luận án Nghiên cứu ảnh hưởng của điều kiện vi trọng lực mô phỏng lên sự tăng sinh và cấu trúc khung xương của tế bào hạt nang noãn heo

Tên luận án:

NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN VI TRỌNG LỰC MÔ PHỎNG LÊN SỰ TĂNG SINH VÀ CẤU TRÚC KHUNG XƯƠNG CỦA TẾ BÀO HẠT NANG NOÃN HEO

Ngành:

Công nghệ Sinh học

Tóm tắt nội dung tài liệu:

Luận án này tập trung vào việc nghiên cứu ảnh hưởng của điều kiện vi trọng lực mô phỏng lên các quá trình sinh lý và thay đổi tế bào, đặc biệt là đối với sức khỏe sinh sản của phi hành gia nữ. Công trình này giải quyết khoảng trống nghiên cứu hiện có tại Việt Nam và trên thế giới về tác động của vi trọng lực mô phỏng lên tế bào hạt nang noãn heo (pGCs).

Mục tiêu chính của nghiên cứu là xác định phương thức tác động của điều kiện vi trọng lực mô phỏng lên sự phát triển của tế bào pGC in vitro. Cụ thể, nghiên cứu tìm hiểu sự khác biệt về tăng sinh và apoptosis của tế bào pGC trong điều kiện bình thường và vi trọng lực mô phỏng. Đồng thời, khảo sát ảnh hưởng của vi trọng lực mô phỏng lên sự biểu hiện của các protein điều hòa chu kỳ tế bào như Cyclin A, Cdk4, Cdk6, và các protein cấu trúc khung xương tế bào như α-tubulin, β-actin.

Các nội dung nghiên cứu chính bao gồm phân lập và nuôi cấy tế bào pGC, đánh giá sự tăng sinh và quá trình apoptosis, cùng với việc khảo sát sự thay đổi hình thái và cấu trúc khung xương của tế bào pGC. Kết quả sau 72 giờ nuôi cấy cho thấy vi trọng lực mô phỏng làm giảm đáng kể sự biểu hiện của các protein điều hòa chu kỳ tế bào chính (Cyclin A1, A2, CDK4, CDK6), dẫn đến việc tế bào đi vào pha nghỉ. Hơn nữa, nghiên cứu cũng chứng minh vi trọng lực mô phỏng làm giảm biểu hiện của các protein cấu trúc (β-actin và α-tubulin), gây ra sự thay đổi trong quá trình tổng hợp hệ thống vi sợi, vi ống và cảm ứng tái cấu trúc bộ khung xương tế bào. Sự suy giảm này là nguyên nhân chính dẫn đến sự ức chế tăng sinh tế bào hạt pGC.

Luận án là công trình đầu tiên đánh giá sự thay đổi hình thái và phân tử trên pGC dưới điều kiện vi trọng lực mô phỏng tại Việt Nam và trên thế giới (tính đến thời điểm công bố), góp phần bổ sung kiến thức về đặc tính và ảnh hưởng của vi trọng lực lên mật độ tế bào, chu kỳ tế bào, apoptosis, và các yếu tố phiên mã, dịch mã cũng như cấu trúc khung xương tế bào. Nghiên cứu đề xuất tiếp tục khảo sát trên tế bào hạt nang noãn người, cơ chế điều hòa hormone, và sự tương tác giữa các tế bào trong buồng trứng.

Mục lục chi tiết:

• CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN

  • 1.1. Giới thiệu về vi trọng lực và vi trọng lực mô phỏng
  • 1.2. Các thí nghiệm không gian
  • 1.3. Những thay đổi diễn ra trong các chuyến bay ngoài không gian
  • 1.4. Ảnh hưởng của vi trọng lực lên sự thụ tinh và thai kỳ
  • 1.5. Các thiết bị vi trọng lực mô phỏng
  • 1.6. Tổng quan về noãn và tế bào hạt thành nang noãn
  • 1.7. Sự tăng sinh và chu kỳ tế bào
  • 1.8. Khung xương tế bào

• CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

  • 2.1. Vật liệu
  • 2.2. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
    • 2.2.1. Nuôi cấy tế bào
      • 2.2.1.1. Thu mẫu buồng trứng
      • 2.2.1.2. Thu nhận nang noãn đơn
      • 2.2.1.3. Phương pháp thu nhận và nuôi cấy pGC
      • 2.2.1.4. Phương pháp cấy chuyền pGC
    • 2.2.2. Phương pháp nhuộm nhân pGC
    • 2.2.3. Phương pháp thử nghiệm vi trọng lực
    • 2.2.4. Phương pháp đánh giá sự tăng sinh tế bào
      • 2.2.4.1. Đánh giá mật độ tế bào bằng WST-1
      • 2.2.4.2. Đánh giá chu kỳ tế bào, biểu hiện dịch mã
    • 2.2.5. Phương pháp đánh giá quá trình apoptosis
      • 2.2.5.1. Đánh giá tỉ lệ apoptosis bằng phương pháp tế bào dòng chảy
      • 2.2.5.2. Đánh giá biểu hiện phiên mã của các gene apoptosis
    • 2.2.6. Phương pháp đánh giá sự thay đổi hình thái nhân và tế bào chất
      • 2.2.6.1. Phương pháp đánh giá hình thái nhân
      • 2.2.6.7. Phương pháp đánh giá hình thái tế bào chất
    • 2.2.7. Đánh giá sự thay đổi cấu trúc khung xương tế bào
      • 2.2.7.1. Đánh giá biểu hiện mức phiên mã các gene mã hóa vi ống, vi sợi
      • 2.2.7.2. Đánh giá biểu hiện mức dịch mã các gene mã hóa vi ống, vi sợi
    • 2.2.8. Phương pháp thống kê

• CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

  • 3.1. Kết quả thu nhận và nuôi cấy tế bào hạt thành nang noãn heo
    • 3.1.1 Kết quả thu nhận nang trứng và pGC
    • 3.1.2. Kết quả nuôi cấy. cấy chuyền và tăng sinh pGC
  • 3.2. Kết quả đánh giá sự tăng sinh của pGC dưới điều kiện vi trọng lực
    • 3.2.1. Kết quả đánh giá sự thay đổi mật độ tế bào bằng phương pháp WST-1
    • 3.2.2.1. Tỉ lệ các pha trong chu kỳ tế bào
  • 3.2.3 Kết quả đánh giá chu kỳ tế bào
    • 3.2.3.1. Kết quả đánh giá tỉ lệ các pha
    • 3.2.3.2. Kết quả đánh biểu hiện phiên mã cdk4, cdk6.
    • 3.2.3.3. Kết quả đánh biểu hiện phiên mã Cyclin A, và Cyclin D
    • 3.2.3.4. Kết quả đánh giá biểu hiện dịch mã của Cdk4 và Cdk6
    • 3.2.3.5. Kết quả đánh giá biểu hiện dịch mã của Cyclin A và Cyclin D
  • 3.3. Kết quả đánh giá quá trình apoptosis
    • 3.3.1. Kết quả đánh giá tỉ lệ apoptosis bằng phương pháp tế bào dòng chảy
    • 3.3.2. Kết quả đánh giá biểu hiện phiên mã của các gene apoptosis
  • 3.4. Kết quả đánh giá sự thay đổi hình thái tế bào
    • 3.4.1. Sự thay đổi hình thái nhân
    • 3.4.2. Kết quả đánh giá các dạng hình thái tế bào hạt
  • 3.5. Kết quả đánh giá sự thay đổi cấu trúc khung xương tế bào
    • 3.5.1. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của vi trọng lực lên vi ống
      • 3.5.1.1 Đánh giá sự thay đổi của vi ống ở mức phiên mã.
      • 3.5.1.2 Đánh giá sự thay đổi cấu trúc vi ống
      • 3.5.1.3 Đánh giá sự thay đổi của vi ống ở mức dịch mã
    • 3.5.2. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của vi trọng lực lên vi sợi
      • 3.5.2.1 Đánh giá sự thay đổi của vi sợi ở mức phiên mã.
      • 3.5.2.2. Đánh giá sự thay đổi cấu trúc vi sợi
      • 3.5.2.3. Đánh giá sự thay đổi của vi sợi ở mức dịch mã

• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

• NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN

• DANH MỤC CÁC BÀI BÁO ĐÃ XUẤT BẢN LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN